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类别:技术参数 出处:维库仪器仪表网 发布于:2017-09-23 10:54:46 | 29630 次阅读
荧光分光光度计与紫外分光光度计属一类产品,结构均由激发光源、单色器、样品室、光电倍 增管和读出(记录)装置所组成。但是它们光源是不同的,荧光分光光度计多采用高压汞灯、氙灯和激光光源。同时,荧光测量多采用激发光和发射光成直角的光路,仪器组件的布置有所不同。
下图为某型号荧光分光光度计的光学系统图,其主要工作原理是:当光源光束经入射单色器色散,提取所需波长单色光照射于样品上,由样品发出的荧光经发 射单色器色散后照射于光电倍增管,光电倍增管把荧光强度信号转化成电信号并经放器放大后记录或读出信号。
荧光分光光度计的光学系统图
1.氙灯(150W);2.透镜;3.光束分裂器;4.水平狭缝;5.激发单色器光栅;6.参考放电管;7.关闸;8.样品室关闸;10.发射单色器光栅;12.光电倍增管
(1)激发光源:要比吸收法中光源强度大。
汞灯:发射强度大、稳定,不需复杂电源,但谱线不连续,数目少,主要用于滤片荧光计。
碘钨灯:提供连续光谱300~700mn。
氙灯:发出射线的强度大,谱线连续,分布于200~700 nm光域内,且在300~400nm 波段内射线强度几乎相等,但该灯的电源功率要求大,且电源稳定,因此电源结构复杂。
激光:发光强度大,能极大地提高荧光分析的灵敏度。
(2)样品池:通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。测量液体时,光源与检测器成直角安排;测量固体时,光源与检测器成锐角安排。低温荧光测定时在一样品池外套一个液氮的透明石英真空瓶。
(3)单色器:荧光分光计通常具有两个滤光片:滤光片在光源与样品池之间,滤去不需要的光,让需要的激发光通过。第二滤光片在样品池与检测器之间,滤去溶剂散射 光、容器表面散射光、杂质发出的光等,让待测物质发射的荧光通过。
荧光分光光度计通常具有两个光栅,位置同滤光片,单色性好。
(4)检测器:因荧光通常较弱,采用光电倍增管作检测器,灵敏度高。选择光电倍增管要考虑:响应波长、灵敏度和嗓声水平。 蓝敏管对蛋白质、核酸的测量适用,而红敏管则适用于荧光染料检测。
(5)显示系统:光度表、计算机操作系统等。
补充说明:与紫外分光光度计的结构区别:
1.荧光分光光度计采用的是垂直的测量方式,以消除透射光的影响。
2.检测器前面有无单色器,荧光分光光度计有两个单色器又上图可以看出,能够获得单色性较好的激发光并消除其他杂散光干扰。
正确了解荧光分光光度计的结构,也是能够帮助我们更好使用和操作,一定要仔细阅读哈~
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