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类别:操作使用 发布于:2017-12-04 15:36:43 | 1321 次阅读
高效液固色谱仪是利用样品各组分在固定相和流动相中吸附-解吸作用的差异,使各组分在作相对运动的两相中反复多次受到吸附-解吸作用而达到相互分离。
主要类型:
液固吸附色谱
1.1分离原理液固色谱是基于各组分吸附能力的差异进行混合物分离的,其固定相是固体吸附剂。
1.2固定相;吸附色谱固定相可以分为极性和非极性两大类。
1.3流动相;流动相要求:
1.3.1选用的溶剂应当与固定相互不相溶,并能保持色谱柱的稳定性
1.3.2选用的溶剂应有高纯度,以防所含微量杂质在柱中积累,引起柱性能的改变。
1.3.3选用的溶剂性能应与所使用的检测器相匹配,如果使用紫外吸收检测器,就不能选用在检测波长下有紫外吸收的溶剂;若使用示差折光检测器,就不能用梯度洗脱。
1.3.4选用的溶剂应对样品有足够的溶解能力,以提高测定的灵敏度。
1.3.5选用的溶剂应具有低的黏度和适当低的沸点。
1.3.6应尽量避免使用具有显著毒性的溶剂,以保证工作人员的安全
1.4应用:液固色谱是以表面吸附性能力为依据的,所以它常用于分离极性不同低的化合物,也能分离那些具有相同极性基团,但数量不同的样品。
液液分配色谱
1.1分离原理;分配色谱法的原理与液液萃取相同,都是分配定律。
1.2固定相;分配色谱固定相由两部分组成,一部分是惰性载体,另一部分是涂渍在惰性载体上的固定液。
1.3流动相;分内色谱中,要求流动相尽可能不与固定液互溶
1.4应用;既能分离极性化合物,又能分离非极性化合物。由于不同极性键合固定相的出现,分离的选择性可得到很好的控制。
键合相色谱
1.1分离原理
1.1.1正键合相色谱分离远离:使用的是极性键和固定性,溶质在此类固定相上的分离机理属于分配色谱。
1.1.2反键合相色谱分离原理:使用的是极性较小的键合固定相,其分离机理可用疏溶剂作用理论来解释。
1.2固定相;按极性大小可分为非极性、弱极性、极性化学键合固定相三种。
1.3流动相
1.3.1正键合相色谱中,采用和反相液液分配色谱相似的流动相,流动相的主体成分为己烷或庚烷。
1.3.2反相键合相色谱中,流动相采用和反相液液分配色谱相似的流动相,主题为水。
1.4应用
1.4.1正键合相色谱法的应用:多用于分离各类极性化合物如染料、炸药、多巴胺、氨基酸等;
1.4.2反键合相色谱法的应用:由于操作简单,稳定性和重复性好,该方法已成为一种通用型液相色谱分析方法。在生物化学、医药研究、食品分析和环境污染分析等多个领域有了很大的应用和发展。
凝胶色谱
凝胶色谱又称分子排阻色谱,它是按照分子尺寸大小顺序进行分离的一种色谱方法。凝胶色谱法的固定相凝胶是一种多孔性的聚合材料,有一定的形状和稳定性。根据所用流动相的不同,凝胶色谱法可以分为两类:即用水溶剂做流动相的凝胶过滤色谱法(GFC)与用有机溶剂如四氢呋喃做流动相的凝胶渗透色谱法(GPC)。
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