全自动固相萃取仪的使用步骤和注意事项

 　  全自动固相萃取仪是一种用于样品前处理的自动化设备，旨在替代繁琐、耗时且易出错的手工固相萃取（SPE）操作。它通过程序化控制，自动完成活化、上样、淋洗、干燥、洗脱等步骤，显著提高了样品处理的效率、重现性和安全性。以下是全自动固相萃取仪的使用步骤和注意事项：
　　一、使用前准备
　　1.阅读说明书：仔细阅读仪器和所用SPE柱/板的说明书，了解仪器的操作流程、维护要求以及SPE柱的特性（如填料类型、柱容量、溶剂兼容性等）。
　　2.准备试剂与耗材：
　　溶剂：准备所需的所有溶剂（如活化溶剂、淋洗溶剂、洗脱溶剂），并确保其纯度和新鲜度。使用前通常需要脱气（特别是反相SPE）。
　　SPE柱/板：根据目标物的性质和基质选择合适的SPE柱（如C18、HLB、离子交换柱等）和规格（如60mg/3mL,200mg/6mL）。检查柱子是否完好无损。
　　收集管/板：准备干净、匹配的样品收集管或96孔板。
　　样品：准备好待处理的样品，必要时进行预处理（如过滤、pH调节、稀释等）。
　　3.安装与连接：
　　将SPE柱/板牢固地安装在仪器的固定架上。
　　连接好溶剂瓶、废液瓶和真空/正压源（根据仪器类型）。
　　确保所有管路连接正确、无泄漏。
　　二、仪器操作步骤
　　1.开机与初始化：
　　打开仪器电源，启动控制软件。
　　仪器通常会进行自检和初始化，确保各模块（泵、阀、机械臂等）工作正常。
　　2.创建或选择方法：
　　在控制软件中，根据分析需求创建新的萃取方法或调用已有的标准方法。
　　关键参数设置：
　　活化：选择活化溶剂（通常为强洗脱力的有机溶剂，如甲醇），设置体积和流速。目的是润湿填料并去除杂质。
　　平衡：选择平衡溶剂（通常为与样品基质相近的弱溶剂，如水或缓冲液），设置体积和流速。目的是将填料调整到适合目标物保留的状态。
　　上样：设置样品体积、上样流速。流速控制至关重要，过快可能导致目标物未被有效保留而流失。
　　淋洗：选择淋洗溶剂（去除基质干扰物），设置体积和流速。溶剂强度应足以洗去杂质但不足以洗脱目标物。
　　干燥：（可选，尤其对后续LC-MS分析）用正压或真空吹扫去除柱中残留的水分或极性溶剂，避免干扰。
　　洗脱：选择洗脱溶剂（将目标物从柱上解吸下来），设置体积和流速。通常使用小体积强溶剂以达到浓缩效果。
　　流速与压力：根据SPE柱规格和溶剂粘度设置合适的流速和真空/正压值。
　　样品/溶剂位置：在软件中设定样品盘、溶剂瓶、收集位置的具体坐标。
　　3.放置样品与耗材：
　　将装有样品的容器（如离心管、烧杯）放入样品盘的指定位置。
　　将收集管/板放入收集架的指定位置。
　　确认所有位置信息与软件设置一致。
　　4.运行方法：
　　在软件中确认所有设置无误。
　　启动运行。仪器将按照预设程序自动执行：
　　移液探针移动到活化溶剂瓶，吸取溶剂，注入SPE柱。
　　重复进行平衡、上样、淋洗、干燥、洗脱等步骤。
　　洗脱液被收集到指定的收集管/板中。
　　运行过程中，可通过软件监控进度和状态。
　　5.运行后处理：
　　运行结束后，仪器通常会发出提示。
　　取出收集了洗脱液的收集管/板。
　　如果洗脱液体积较大或溶剂不兼容后续分析（如GC-MS），可能需要进行氮吹浓缩或溶剂转换。
　　将处理好的样品准备进行后续分析（如HPLC,GC-MS,LC-MS等）。
　　三、清洁与维护
　　1.日常清洁：每次使用后，用适当的溶剂（如甲醇、水）冲洗管路系统，防止堵塞和交叉污染。
　　2.定期维护：根据厂家建议，定期更换过滤器、密封圈、管路等易损件。
　　3.长期不用：长期不用时，应将系统管路中充满惰性溶剂（如甲醇），并妥善存放。
　　四、注意事项
　　1.交叉污染：确保移液探针和管路系统清洁，必要时增加清洗步骤。处理不同样品时注意顺序。
　　2.气泡：溶剂瓶和管路中避免产生气泡，会影响体积精度和流速稳定性。
　　3.SPE柱选择：正确选择SPE柱是成功的关键，需基于“相似相溶”原理和目标物的理化性质。
　　4.pH控制：对于离子型化合物，调节样品和溶剂的pH值以确保目标物能被有效保留和洗脱。
　　5.流速控制：上样和洗脱流速不宜过快，否则影响回收率。
　　6.安全：处理有机溶剂时，确保仪器在通风良好的环境中运行，废液妥善处理。
　　总结：
　　全自动固相萃取仪极大地简化了样品前处理流程。成功使用的关键在于充分的准备、正确的方法开发与参数设置、以及规范的操作和维护。遵循上述步骤和注意事项，可以确保获得高回收率、高重现性的样品处理结果，为后续的分析奠定坚实基础。