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类别:工作原理 发布于:2025-05-26 14:42:25 | 510 次阅读
多功能酶标仪是一种广泛应用于生物化学、分子生物学、免疫学等领域的实验室设备,主要用于检测微孔板中的生化反应结果。以下是多功能酶标仪的工作原理概述:
1. 吸光度
基于比尔-朗伯定律,即光通过溶液时的吸收程度与溶液中吸收物质的浓度成正比。酶标仪使用光源发出特定波长的光穿过微孔板中的样品,然后通过光电二极管或光电倍增管测量透射光的强度。根据透射光强的变化计算出样品的吸光度值,进而推算出目标物质的浓度。
2. 荧光强度
当某些分子被激发光照射后会发射出比激发光波长长的荧光。酶标仪配备有特定波长的选择性滤光片或单色器,用于产生激发光并过滤掉非目标波长的光。样品中的荧光分子在受到激发光照射后会产生荧光,该荧光被仪器收集并通过光电探测器转换为电信号,从而定量分析样品中的荧光强度。
3. 发光
不同于荧光需要外部光源激发,发光是指样品自身发生的化学反应释放能量以光的形式表现出来。例如,在报告基因实验中,萤火虫荧光素酶催化底物荧光素氧化发光。酶标仪直接检测这种自发产生的光信号,无需激发光源,只需高灵敏度的光电探测器来捕捉微弱的发光信号。
4. 时间分辨荧光
这是一种特殊的荧光检测技术,利用镧系元素螯合物作为标记物,这些标记物具有较长的荧光寿命。通过延迟读取荧光信号的时间窗口,可以有效减少背景噪音,提高信噪比。酶标仪在此模式下会在激发脉冲之后等待一段短时间再开始测量荧光信号,从而实现对特异性标记物的检测。
多功能酶标仪能够进行多种类型的光学检测,包括吸光度、荧光强度、发光(以及时间分辨荧光等)。
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