超微量分光光度计的工作原理介绍

　　超微量分光光度计是一种高精度的分析仪器，专门设计用于测量非常少量（通常为微升级别）的液体样本中的核酸、蛋白质等生物分子的浓度和纯度。其工作原理基于紫外-可见光吸收光谱法，通过检测特定波长下的吸光度来确定样品中目标物质的浓度。以下是超微量分光光度计的工作原理概述：
　　1.朗伯-比尔定律：这是分光光度计的基础理论，它指出当一束单色光穿过含有吸收物质的溶液时，光强度的减弱程度与该溶液的浓度成正比，也与光穿过的路径长度成正比。数学表达式为A=ε?c?l，其中A代表吸光度，ε是摩尔吸光系数，c表示溶液浓度，而l则是光程长度。
　　2.光源：提供一个稳定的连续或半连续波长范围内的光线，通常是紫外到可见光区域（约190nm至850nm），这对于检测核酸（如DNA、RNA）和蛋白质特别重要。
　　3.单色器：将来自光源的复合光分解成单一波长的光，以便地测定不同物质在特定波长下的吸收特性。
　　4.样品室：在超微量分光光度计中，样品直接放置于一个小体积的平台上，无需使用传统的比色皿。这允许使用极少量的样品（通常只需0.5-2μL），并且可以直接滴加到测量头上进行检测。
　　5.检测器：接收经过样品后的透射光，并将其转换为电信号。根据接收到的光强度变化计算出吸光度值。
　　6.软件分析：内置软件会自动计算出样品的浓度和纯度比（例如对于核酸，可以计算A260/A280比率以评估纯度）。用户也可以手动设置参数或者导出数据进行进一步分析。
　　总结：通过上述过程，超微量分光光度计能够高效准确地对微量生物分子进行定量分析，成为现代生命科学研究不可或缺的工具之一。