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类别:操作使用 发布于:2026-10-12 09:43:53 | 38 次阅读
发酵尾气分析仪是生物制药、食品发酵及生物工程领域中用于实时监测发酵罐内微生物代谢状态的关键设备。它主要通过检测排气中的氧气和二氧化碳浓度,结合通气量数据,计算出氧摄取速率、二氧化碳释放速率和呼吸商,从而判断菌体的生长阶段、溶氧状况及是否存在染菌或噬菌体感染。以下是关于发酵尾气分析仪的详细使用指南与注意事项:
一、标准操作流程
1.开机前准备
检查气路连接,确保取样管从发酵罐顶部排气口引出,经过冷凝器去除水汽后连接到分析仪的进气口。确认管路无泄漏、无积水堵塞。检查气体供应,确认分析仪所需的辅助气体如高纯氮气和高纯混合标气的压力正常,气瓶阀门开启。检查电源,确认仪器接地良好,电压稳定。
2.开机预热与校准
打开主电源,启动分析仪软件。电化学传感器或红外传感器通常需要三十分钟至两小时的预热时间以达到热平衡和信号稳定。进行零点校准,通入高纯氮气或干燥空气,在软件中执行零点校准,确保基线归零。进行跨度校准,通入已知浓度的标准混合气体,待读数稳定后执行跨度校准,使仪器显示值与标气浓度一致。建议每次发酵批次开始前必须校准,若发酵周期长,中途需定期复核。
3.采样与分析
建立采样回路,将取样探头插入发酵罐排气总管,确保流量控制器设定合适的采样流量,通常为每秒零点五到一点升。启动数据采集软件,设置采样频率,通常每分钟记录一次。实时监控氧摄取速率、二氧化碳释放速率和呼吸商曲线变化。呼吸商等于二氧化碳释放速率除以氧摄取速率。当呼吸商约为一时,通常表示葡萄糖作为碳源进行有氧呼吸。当呼吸商小于一时,可能利用脂质或有机酸。当呼吸商大于一时,可能产生乙醇等副产物或存在厌氧区域。
4.关机与维护
发酵结束后,继续通入零气或空气吹扫传感器十分钟到十五分钟,清除残留样品气。先关软件,再关仪器电源,后关闭气瓶总阀。拆卸取样管时,注意排放管内残余冷凝水,防止倒流污染仪器。
二、关键注意事项
1.冷凝水处理
发酵尾气含有大量饱和水汽,直接进入仪器会损坏传感器并导致读数漂移。必须在取样管线路上安装高效的冷凝器或冷阱。定期检查冷凝器排水口,确保冷凝水能顺畅排出,避免形成液封阻碍气流。在冷凝器后加装疏水过滤器,进一步拦截微小水滴。
2.交叉干扰
部分电化学传感器在测量氧气时会对高浓度二氧化碳产生响应误差。选用具有二氧化碳补偿功能的分析仪。确保二氧化碳传感器和氧气传感器的采样路径同步,或使用双通道独立采样。定期使用多组分标气进行多点校准。
3.传感器寿命与维护
电化学传感器的电解液会随时间消耗,寿命通常为六个月到十二个月。当灵敏度下降或校准无法通过时,需更换传感器芯。非色散红外传感器寿命较长,但光源和探测器可能受粉尘影响,需定期清洁光路窗口。避免硫化物、卤代烃、硅酮等物质进入传感器,这些物质可能导致传感器中毒失效。
4.流量稳定性
氧摄取速率和二氧化碳释放速率的计算依赖于准确的尾气流量。如果采样流量波动,会导致计算误差。使用高精度质量流量控制器。定期校验质量流量控制器的准确性。确保发酵罐背压稳定,避免因泡沫夹带或管道堵塞引起气流波动。
5.数据解读的逻辑性
若呼吸商突然飙升,可能是染菌、噬菌体爆发、或搅拌通气故障导致局部缺氧。若氧摄取速率骤降,可能是菌体死亡、溶氧探头故障或营养耗尽。若二氧化碳读数异常高但氧摄取速率正常,检查是否二氧化碳传感器被水汽污染或需要重新校准。尾气分析存在一定的时间滞后,需在数据处理时考虑死区时间。
6.安全操作
若发酵过程涉及易燃溶剂或氢气产生,分析仪及其周边区域需符合防爆等级。发酵罐排气压力可能较高,取样减压阀必须可靠,防止高压气体冲击传感器。
三、常见故障排除
1.读数漂移大的原因可能是传感器未预热充分、冷凝水积聚或漏气。解决方法为延长预热时间、检查冷凝器和疏水滤芯、检漏。
2.氧气读数始终为零的原因可能是传感器电解液干涸、采样泵故障或标气错误。解决方法为更换传感器芯、检查采样泵、验证标气浓度。
3.二氧化碳读数偏高的原因可能是环境二氧化碳干扰、传感器老化或校准错误。解决方法为检查背景环境、重新校准、必要时更换传感器。
4.氧摄取速率或二氧化碳释放速率计算异常的原因可能是流量测量不准或温度压力补偿未启用。解决方法为校验质量流量控制器、确认仪器已启用温压补偿功能。
5.报警频繁的原因可能是阈值设置过严或信号噪声大。解决方法为调整报警延迟时间、检查接地和屏蔽线。
四、总结
发酵尾气分析仪是发酵过程的监控核心。其核心价值不在于单个氧气或二氧化碳的数值,而在于动态变化的趋势曲线。成功使用的关键点在于做好冷凝水管理,这是基础。定期校准是数据可信度的保证。结合工艺理解数据分析,不能孤立看待仪表读数。建议建立详细的分析仪维护保养记录,包括校准日期、传感器更换日期、故障处理记录,以便追溯和预测维护周期。
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